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Helena SPIFE电泳仪尿蛋白电泳操纵规程

出处:web 2011年07月14日作者:web责任编辑:yousi点击:4158

SPIFE电泳仪各种液体配制方法:

1.染色液(STAIN):1升10%的冰醋酸复溶干粉染料。

2.脱色液(DESTAIN):11升的蒸馏水加CitricAcidDestain晶体。

3.清洗液(WASH):8升的蒸馏水加Tris-BufferdeSaline晶体。

电泳仪操纵流程:

一、电泳部分:

1.打开仪器电源;

2.尿液样本的处理:临床送检样本需进行尿蛋白定性实验,对于定性实验两个加号以上的标本要进行适当的稀释;

3.将预备好的样本用移液器取17ul加在点样盘的样本位中,留意不能有气泡;

4.把点样刷按4、11、18的位置放进加样器中;

5.将2ml左右的界面液加在电泳槽上;

6.从试剂盒中取出琼脂糖片,移往琼脂糖上的一层薄膜,然后将琼脂糖片放进电泳槽中留意琼脂糖片下面不要有气泡;

7.将滤纸(BlotterC)平展在琼脂糖片上等滤纸完全浸湿后移往滤纸;

8.将加样器放在点样盘上,同时启动程序,按START键两次再按CONTINUE键一次后按下加样器上的UP/DOWN开关,同时依程序中的倒计时时间听到仪器蜂叫声后向上拨UP/DOWN开关,把加样器放进电泳槽中按CONTINUE键一次后按下UP/DOWN开关同时仪器开始倒计时,听到蜂叫声后向上拨动UP/DOWN开关,点样结束;

9.移开加样器,放好电极棒,关上电泳槽盖,按CONTINUE键一次进进电泳;

10.听到仪器蜂叫声后放进抗血清模板,在模板的各个条带中加进各自的抗血清50ul完毕后按CONTINUE键进进孵育;

11.听到仪器蜂叫声后将滤纸梳子(IFEBlotterCombs)放进模板的孔中按CONTINUE键吸收多余抗血清;

12.听到仪器蜂叫声后移开梳子和模板(BlotterD)平展在琼脂糖片上,按CONTINUE键后用手在滤纸上施加均匀的力度并往返移动不少于3分钟;

13.听到仪器蜂叫声后移开滤纸CONTINUE键进行烘干;烘干温度定为60℃;

14.听到仪器蜂叫声后按CONTINUE键结束电泳程序。

二、染色部分:

1.将琼脂糖片拿出挂在托架上放进染色槽中,小心不要将凝胶碰到染色槽壁,选择好程序后按两次START键两次CONTINUE,仪器自动完成染色、脱色、烘干的进程;

2.听到蜂叫声后程序结束,按CONTINUE完成染色程序,拿出托架取下琼脂糖片进行扫描。

三.扫描部分

1.启动PT扫描程序,输进密码,双击对话框中的数据文件两次;

2.在PT的主画面中点击新建图标,选择Gel下拉菜单中凝胶类型,再点击扫描;

3.在曲线框中对曲线进行编辑,打印报告

 

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